Выделение днк в домашних условиях. Презентация по исследовательской работе на тему Экстракция ДНК в домашних условиях

Одной из основных задач генной инженерии является получение белков с заранее заданными свойствами. Для решения этой задачи необходимо уметь направленно изменять мельчайшие составные части генов – отдельные пары нуклеотидов молекулы ДНК. Такие операции c самой большой молекулой стали возможными сравнительно недавно и связываются в сознании обычного человека с ультрасовременными лабораториями, оборудованными сложными и дорогими приборами. Читая о современных достижениях генной инженерии, наверное, мало кто предполагает, что выделить и потрогать довольно чистый препарат «святая святых» жизни – ДНК – можно не только в специальных лабораториях, но и в домашних условиях. Экспериментируя, вы сможете усовершенствовать и изменить предлагаемые процедуры и узнать много нового об одном из важнейших компонентов клетки.

Нативная цепь молекулы ДНК может содержать несколько миллионов атомов. В водном растворе цепи ДНК несут слабый отрицательный заряд и отталкиваются друг от друга. Если в растворе в достаточном количестве присутствуют положительно заряженные ионы, они притягиваются к цепям ДНК и нейтрализуют их заряд, в результате чего цепи ДНК могут слипаться. Таким образом, изменяя концентрацию соли, можно заставить отдельные фрагменты ДНК диссоциировать или, наоборот, объединяться. Это явление и лежит в основе методов выделения ДНК из клеток.

Почти все необходимое для выделения ДНК вы сможете найти на кухне. Сначала надо приготовить буферный раствор (буфер). Налейте 120 мл воды в чистую стеклянную емкость, добавьте 1,5 г (1/4 чайной ложки) поваренной соли, 5 г (1 чайную ложку) питьевой соды. В буфер надо добавить немного детергента – 5 мл (1 чайную ложку) шампуня или жидкого средства для стирки. Можно попробовать какие-нибудь другие детергенты, например средства для мытья посуды, но туалетное мыло лучше не использовать, т.к. в нем содержится большое количество добавок. Детергент выполняет две функции: разрушает клеточные стенки и способствует расщеплению крупных белков, которые иначе могут выделиться вместе с ДНК. Для того чтобы замедлить деградацию выделенной ДНК, буфер перед началом опыта охлаждают в кастрюле или любом другом сосуде, наполненном смесью колотого льда с солью.

Для приготовления буфера лучше использовать очищенную поваренную соль и дистиллированную воду, но подойдут также йодированная соль и покупная вода в бутылках или фильтрованная вода. Водопроводную воду из-под крана лучше не использовать.

В качестве источника ДНК подойдут овощи или фрукты. Хорошие результаты получаются с луком, чесноком, бананами и томатами. Но вы можете попробовать какой-нибудь другой фрукт или овощ. Возьмите его, разрежьте на мелкие кусочки, поместите в подходящий по размерам чистый сосуд, добавьте немного воды и тщательно измельчите до однородного состояния миксером с ножами (блендером), включая его несколько раз на 10 с с небольшими перерывами. Если нет миксера, можно использовать давилку для чеснока. При такой обработке клетки отделяются друг от друга, что способствует более эффективному действию детергента.

Поместите 5 мл полученного пюре в чистую емкость, добавьте 10 мл охлажденного буфера. Полученную смесь энергично перемешивайте в течение не менее 2 мин – в это время происходит разрушение клеточных стенок детергентом и выход содержимого клеток в раствор. Далее нужно отделить раствор, содержащий ДНК и другие молекулы, от нерастворимых остатков растительного материала. Для этого лучше всего использовать центрифугу (сепаратор): смесь прокрутите на центрифуге на низкой скорости в течение 5 мин, а затем, стараясь не взбалтывать осадок, слейте в длинный узкий сосуд (например, в пробирку, прозрачный пузырек из-под лекарств и т.п.) не менее 5 мл надосадочной жидкости.

Если у вас нет центрифуги, можно отфильтровать раствор через обычный кофейный фильтр или полотно. Если вам повезет, крупные частицы, все-таки прошедшие через фильтр, либо осядут на дно, либо будут плавать на поверхности. Для получения чистого раствора слейте его верхний слой, подождите, пока осядут остальные частицы, и затем аккуратно слейте (или перенесите пипеткой) жидкость в узкий сосуд.

Полученный раствор содержит фрагменты ДНК и множество других молекул – РНК, белков, углеводов и т.п.

Для экстракции ДНК необходимо небольшое количество изопропилового спирта (изопропанола, ИПС), предварительно сильно охлажденного в морозильнике. Используйте чистый изопропанол (без красителей и отдушек) в самой высокой концентрации, какую только удастся достать (обычно его продают в концентрации не ниже 70%). При помощи соломинки для коктейлей аккуратно нанесите 10 мл охлажденного спирта на поверхность раствора ДНК. Для этого погрузите соломинку в сосуд со спиртом и зажмите верхнее отверстие, затем опустите нижний конец соломинки в пробирку с раствором, прикоснитесь соломинкой к стенке и, слегка наклонив пробирку, позвольте спирту медленно стечь по стенке. Не набирайте спирт в трубочку (или пипетку) ртом! Если вы все сделали правильно, спирт, плотность которого меньше плотности буфера, останется на поверхности раствора.

Поместите тонкую стеклянную или деревянную палочку, например карандаш, в раствор таким образом, чтобы ее кончик оказался непосредственно под границей между буфером и спиртом, и очень осторожно в течение 1 мин поворачивайте попеременно в разные стороны. При этом наиболее длинные фрагменты ДНК накрутятся на палочку. Затем вытащите палочку – спирт заставит ДНК прилипнуть к концу палочки, и вы увидите на нем прозрачный вязкий осадок.

Конечно, в результате этой простой процедуры нельзя получить чистый препарат ДНК. В лаборатории в буфер добавляют ферменты, разрушающие млекулы РНК, которые иначе могут выделиться вместе с ДНК.

Даже после самой тщательной экстракции часть ДНК останется в растворе, образуя в нем невидимую паутину. При небольших дополнительных усилиях этот материал тоже можно увидеть. Некоторые красители, например метиленовый синий, связываются с заряженными фрагментами ДНК. Для окраски нитей, образованных оставшейся в растворе ДНК, достаточно добавить в него микроскопическое количество красителя – его молекулы свяжутся с ДНК, оставляя раствор неокрашенным. Возможно, для этой цели подойдут какие-либо пищевые красители или краски для тканей или волос – экспериментируйте!

По материалам
Scientific American,
сентябрь, 1998

К сожалению, многие могут сомневаться в том, что данный метод действительно работает, а сделать ДНК тест не так уж и сложно. На самом деле, специалисты в клинических условиях способны определить связь между людьми не только по анализу крови, но и по ногтю или, например, волосу. Давайте проясним основные вопросы, касающиеся данного процесса, и отметим, как проходит установление факта признания отцовства.

Можно ли верить результатам анализа ДНК на отцовство и как проводится исследование

Современные технологии позволяют установить личность отца ребенка еще до появления малыша на свет, во время его вынашивания. Причем если еще десятилетие назад для подобной процедуры требовалось проведение амниоцентеза - прокола передней брюшной стенки и матки женщины для забора образца околоплодных вод, то теперь медики научились выделять детскую ДНК прямо из крови его матери. Такое исследование возможно уже с девятой недели беременности.

Анализ ДНК на отцовство в домашних условиях

Сегодня, получить информацию об отцовстве могут все сомневающиеся мужчины, благодаря гениальному изобретению — домашнему тесту ДНК. Что это за анализ, что нужно для его проведения и какова достоверность полученного результата, мы расскажем вам в этой статье.

Установление отцовства

ДНК-тест на установление отцовства позволяет с очень высокой точностью (до 99,999999 %) определить являетесь ли вы отцом ребенка. Отрицательный результат будет равен 100%. Для проведения экспертизы необходим биологический материал обоих участников теста - чаще всего мы берем безболезненный мазок с внутренней части щеки. Но возможен также «нестандартный» метод, когда для анализа используется что-то другое: волосы (с луковицей) окурок, жевательная резинка, след крови на одежде и пр. На результат исследования этот фактор не влияет.

ДНК тест установление отцовства в СПб

Если вы хотите установить, является-ли определенный мужчина биологическим отцом ребенка, Вам нужно сделать анализ ДНК отцовство. Данный ДНК тест – самый точный способ определения отцовства на сегодняшний день — точность 99,99999%. Для исключения малейших погрешностей, ДНК тест на отцовство проводится двумя независимыми группами генетиков, и заверяется личной подписью главного врача.

Анализ ДНК в домашних условиях

Самостоятельно произвести сбор биоматериала (инструкция ниже).
Связаться с оператором , который вызовет курьера по Вашему адресу либо сообщит куда необходимо доставить образцы в Вашем регионе. Оператор также назначает номер Вашего заказа и заполняет анкетные данные.

Установление отцовства по анализу ДНК

Предварительно готовиться к сдаче буккального эпителия не нужно. Если мужчина делает анонимное тестирование и проводит сбор материала самостоятельно, в клинике ему выдают пакет с ватными палочками. После взятия образца пакет запечатывается и отправляется на анализ.

Как сдавать ДНК-анализ

Как сдавать ДНК-анализ беременным женщинам? Раньше делали прокол плодного пузыря, чтобы провести забор материала, но тогда появлялась угроза жизни ребенка. Теперь определение отцовства возможно с 9-й недели беременности без риска для здоровья плода и матери. Данная процедура называется дородовым неинвазивным ДНК-анализом на отцовство.

Установление отцовства по ДНК в условиях дома

Живу в Узбекистане, хочу заказать тест на отцовство, к мальчику, который якобы от меня, у меня доступ ограниченный, его стараются мне не показывать. Результаты теста нужны мне, они не будут использованы в других целях, я должен для себя узнать истину: от меня или нет?

Как правильно сделать ДНК-анализ на отцовство

Максимальный процент совпадений – 99,9%. Это вовсе не значит, что вероятность ниже, просто лаборатории придерживаются принципа объективности. Всегда остается вероятность, что у отца ребенка есть брат-близнец. Несмотря на то, что такие случаи – большая редкость, медики при интерпретации эту вероятность учитывают. При таком проценте (около 100%) ошибка исключена.
Достоверность зависит не столько от качественно собранного материала, сколько от профессионализма лаборантов и количества исследуемых локусов (участков цепочки ДНК). Если лаборатория гарантирует анализ около 30-33 локусов, в достоверности такого теста можно не сомневаться.
Если отцом ребенка является исследуемый, то в результате будет указано «биологическое отцовство пациента 1 (ФИО отца) в отношении пациента 2 (ФИО ребенка) не исключено», а затем указывается процент совпадений. Если же исследуемый отцом ребенка не является, в результате будет написано, что сходства генетического материала не обнаружено. Ошибка в этом случае исключена.

Тест ДНК на отцовство — цена и правила проведения процедуры

Сбор слюны считается самой простой и безболезненной процедурой, которую можно провести в домашних условиях. Для этого, согласно предоставленной лабораторной инструкции, ватными палочками слюна берется в полости рта с внутренней стороны щек, губ, а также нижней поверхности языка. Перед этим нужно тщательно прополоскать рот чистой кипяченой водой комнатной температуры. Домашние тесты на отцовство складываются в большой конверт и отправляются с курьером в молекулярный центр.

Определение и Установление отцовства

В соответствии с приказом Министерства Здравоохранения России 161 от 24.04.2003 года для доказательства факта отцовства достаточно точности исследования 99,90%, на практике удаётся достичь ещё большей точности. После проведения процедуры установления отцовства по ДНК становится точно ясно является ли мужчина биологическим отцом конкретного ребенка или нет. Наша генетическая лаборатория позволяет выполнять процедуры установления (определения) отцовства с соблюдением высочайших стандартов качества, быстро и анонимно.

Как установить отцовство ребенка

Вопрос о том, как установить отцовство быстро и с высокой точностью, актуален для женщин, для мужчин, а также повзрослевших детей. Сейчас для этого применяются современные высокоточные методики, которые позволяют безошибочно, с высокой долей вероятности установить истину, разрешить семейные споры.

Днк тест на определение отцовства по крови, волосам и другим нестандартным образцам

Если несколько лет назад достоверной информацией обладала лишь мать малыша, то в век современных технологий ДНК тест на отцовство по крови, по волосам и другими нестандартными способами можно сделать практически в любой лаборатории, которая специализируется на проведении подобных генетических исследований.

Генетический анализ на отцовство

Все перечисленные материалы, кроме первых двух, относятся к нестандартным и чаще всего используются для частных анализов, но не для судебных. Их исследуют на более сложном оборудовании, поэтому и цена генетического анализа на отцовство в таких случаях оказывается выше.

Зачастую через некоторое время после появления на свет первого или последующих детей в семье возникают разногласия, поскольку глава семьи не уверен на сто процентов, что отцом является именно он. Единственным выходом из этой ситуации является проведение теста ДНК, позволяющего проверить степень родства ребенка и его родителей. Во многих областных центрах и просто крупных городах (например, в Москве, Спб, Новосибирске, Екатеринбурге и др.) есть специальные медицинские клиники, в которых можно сдать все необходимые анализы и сделать генетическую экспертизу.

Как сделать анализ на ДНК на отцовство?

Проведение теста ДНК, с помощью которого можно проверить отцовство, производится в специальных лабораториях. Для этой процедуры у ребенка и его предполагаемого отца (или даже отцов) берут определенный генетический материал, в качестве которого может выступать слюна, капли крови, сперма, волос, ноготь. Если есть возможность, то для большей точности результата предоставляется и биоматериал матери малыша. Затем производится сопоставление переданных частиц, и на основании этого выносится общий положительный или отрицательный вердикт, фиксирующийся документально.

Кроме теста на установление отцовства, клиники предоставляют возможность таких анализов:

определение материнства;
исследование с помощью теста сестринских и братских связей;
ДНК тест при беременности, позволяющий проверить наличие или отсутствие генетических заболеваний будущего ребенка;
генетический анализ совместимости донора органов и человека, которому эти органы будут пересаживаться (проводится для того, чтобы проверить приживутся ли пересаженные органы).

Что нужно для анализа ДНК на отцовство?

Тест на отцовство можно сделать добровольно либо по направлению суда. Во втором случае степень родственной связи обычно требуется проверить при разводе с целью принудить бывшего супруга выплачивать алименты.

Прежде всего, необходимо выбрать качественную клинику, в которой можно таким способом проверить верность жены и сделать эту процедуру. Следующим этапом является сбор и предоставление генетического материала. В завершение тест следует оплатить. Устанавливать результаты специалисты будут от трех дней до двух недель.

После завершения процедуры клиника предоставляет документ, на котором официально утверждены полученные данные. Если анализ проводился по направлению суда, то этот результат должен быть отправлен в соответствующие органы, которые обязаны сделать из него свои выводы в пользу отца или матери.

Стоимость анализа ДНК на отцовство

Этот тест стоит недешево. Его минимальная стоимость может достигнуть отметки в пять тысяч рублей, тогда как ценовой максимум колеблется в районе 20-30 тысяч.

К примеру, в Москве средняя цена проверки отцовства составляет около 11 тысяч рублей. Если анализ хочет сделать не только отец, но и мать ребенка, необходимо будет доплатить еще полторы тысячи. В случае участия в процедуре нескольких отцов или нескольких детей стоимость увеличится еще на 7 тысяч. Сделать срочный тест жители Москвы могут, заплатив 14 тысяч, а за использование нестандартного генетического материала к цене прибавляется еще 5 тысяч. Клиники Москвы также предоставляют возможность забора материала прямо на дому у анализируемых людей, а обойдется это им в тысячу рублей.

Однако такие высокие цены (причем не только в Москве) обусловлены максимальной достоверностью результатов, ведь проверить степень родства с гарантией в 99,9% можно только с помощью этой процедуры.

Где сделать ДНК текст в Москве и Спб

Как уже говорилось, наибольшую популярность эта процедура приобрела в крупных городах, поскольку именно там она пользуется максимальным спросом. Максимальное количество клиник, в которых можно сделать эту процедуру и проверить отцовство, находится в Спб и Москве.

Анализ на ДНК на отцовство в Москве можно сделать в следующих клиниках:

Научный центр молекулярно-генетических исследований ДНКОМ
Клиника Креде Эксперто
Медицинский центр Медгород
Многопрофильный медицинский центр Гута Клиник
Клиника Аква Мед
Медицинский центр Петровские ворота и др.

Сделать ДНК тест в Спб можно обратившись в такие генетические лаборатории:

Медицинский центр Медистар
Медицинский центр А.Н. Соколова
Семейная клиника Андромеда
Медицинский центр Панорама Мед. и др.

ДНК тест на отцовство в домашних условиях можно сделать?

Проверить отцовство в специальных центрах довольно сложно жителям небольших городков, ведь им необходимо как-то добраться до лаборатории, в которой будет проводиться ДНК тест, и найти себе на время проведения процедуры жилье, которое в той же Москве стоит недешево. Для них также есть выход, ведь сделать забор биоматериала можно и в домашних условиях.

ДНК тестирование является передовой методикой, которая позволяет с высокой точностью провести анализ ДНК узнать родственную связь, предрасположенность к различным заболеваниям, принадлежность к определенной этнической группе. Данный вид исследований проводится в условиях сертифицированной лаборатории «ДТЛ» , сдать образцы биоматериала можно как в самой Лаборатории Москвы , так и в её официальных представительствах.

При этом клиенты часто задают вопрос: как сделать тест ДНК в домашних условиях и что для этого необходимо ? Поскольку для анализа чаще всего используются образцы буккального эпителия, то забор такого материала можно произвести самостоятельно. Единственное условие – использовать рекомендуемые материалы и строго следовать инструкции.

Как сделать тест ДНК дома самому

Итак, можно ли сделать ДНК-тест в домашних условиях ? Непосредственно генетическое исследование проводится в лабораторных условиях опытными экспертами. А забор образцов биоматериала вполне возможно провести самостоятельно.

Подробная инструкция поможет сделать это быстро и правильно :

Необходимо подготовить материалы – ватные палочки и чистые бумажные конверты из расчета на каждого человека, который участвует в исследовании. Лучший вариант – заказать специальный набор в лаборатории «ДТЛ» .
На конверте указывается личная информация – фамилия, имя, отчество, дата рождения, степень родства и дата забора биоматериала; если процедура является анонимной, то вместо Ф.И.О. указывается номер.
Для взятия мазка с внутренней поверхности щеки у одного человека потребуется две палочки, у которых следует срезать по одной ватной головке.
ВАЖНО! Ватную головку категорически нельзя трогать руками !
Палочку следует аккуратно взять за обрезанный конец и произвести забор биоматериала с внутренней поверхности щеки. Для этого следует сделать как минимум десять движений вверх-вниз, стараясь плотно прижимать ватную головку к слизистой оболочке.
После мазка палочку необходимо подержать на открытом воздухе примерно 60 секунд , чтобы испарилась излишняя влага.
После этого образец помещается в чистый конверт, внутреннюю поверхность которого также нельзя трогать руками.
Процедура полностью повторяется , но мазок уже берется с другой стороны щеки.
Когда образцы биоматериала одного человека собраны, конверт запечатывается исключительно с помощью клейкой полосы .

Таким образом, производится забор проб буккального эпителия для проведения генетической экспертизы. Процедура занимает в среднем 4-5 минут , является безболезненной и абсолютно безопасной для взрослых и детей, собранных образцов вполне достаточно для проведения полноценного ДНК теста на отцовство в Москве и многих других анализов .

Следует отметить, что если необходимо провести тест на отцовство во время беременности , то для этого требуется не только образец буккального эпителия, но также кровь матери. Детальней об этом вы можете узнать у консультантов нашего сайта .

Точность анализа ДНК в домашних условиях

Если Вы не имеете возможности посетить нашу Лабараторию или её официальное представительство, то можете взять образец ДНК дома , соблюдая инструкцию. Если все сделано правильно, то в результате исследования можно не сомневаться, он будет абсолютно достоверным и объективным. Точность результата составляет до 100,0%.

Если Вам потребуется консультационная помощь – обратитесь к нашим специалистам по указанным телефонам и получите подробные ответы на все интересующие вопросы.

Как получить набор для проведения ДНК-теста в домашних условиях

Для взятия образцов можно использовать аптечные ватные палочки, но мы рекомендуем заказать специальный фирменный набор для самостоятельной процедуры . Оформить заказ можно прямо на сайте нашей Лаборатории и абсолютно бесплатно. Наши консультанты, в случае необходимости, окажут профессиональную помощь.